Mitochondrial nitrosative stress in the organs of female mice during the growth of B16/F10 melanoma, organ-specific changes



Cite item

Full Text

Open Access Open Access
Restricted Access Access granted
Restricted Access Subscription or Fee Access

Abstract

BACKGROUND: Melanoma is the fifth most common cancer worldwide, with an estimated global incidence of 2.8–3.1 cases per 100,000 people. Oxidative and nitrosative stress play a key role in the development of many pathological conditions, including malignant tumors. Mitochondria, as the primary source and key target of reactive oxygen and nitrogen species, are of particular interest in oncology. However, the mechanisms by which tumor growth influences nitrotyrosine levels in the mitochondria of critical organs and their relationship with tumor metabolism remain unclear.

AIM: To study the content of nitrotyrosine in the mitochondria of cells of various organs and tissues (brain, heart, liver, kidneys, skin, tumor) of female mice during the growth stages of experimental B16/F10 melanoma.

METHODS: Female C57BL/6 mice (n=84) were used in the experiment. Groups: intact (n=21); comparison group (n=63) – subcutaneous transplantation of B16/F10 melanoma. The timing of B16/F10 melanoma growth: the 1st, 2nd, and 3rd weeks of tumor growth. Mitochondria were isolated using differential centrifugation in a high-speed refrigerated centrifuge. The concentration of nitrotyrosine (nmol/g protein) in mitochondria was determined by ELISA. Statistical analysis of the results was performed using Statistica 10.0 software.

RESULTS: In the mitochondria of organ cells of intact female mice, the content of nitrotyrosine in the brain, heart, and liver was within the same numerical range and was on average 2.7 times lower than in the skin mitochondria and 4.4 times lower than in the kidney mitochondria. After 1 week of melanoma growth in female mice, the nitrotyrosine level in the heart mitochondria increased by 1.3 times (p<0.05), while in the skin mitochondria it decreased by 1.4 times (p<0.05) compared to the values in the intact mitochondria of the corresponding organs. After 2 weeks of melanoma growth, nitrotyrosine levels in the brain, liver, kidney, and skin mitochondria decreased by 1.4 times (p<0.05),  1.3 times (p<0.05), 1.3 times (p<0.05), and 1.5 times (p<0.05), respectively, relative to the levels in intact mitochondria. During this period, a 1.5-fold increase (p<0.05) in nitrotyrosine levels was observed in the heart mitochondria. After 3 weeks of melanoma growth, nitrotyrosine levels in the brain and skin mitochondria decreased by 2.0 times and 8.0 times, respectively. A progressive decrease in nitrotyrosine levels was observed in the mitochondria of melanoma cells as the melanoma progressed up to and including week 3. Compared to nitrotyrosine levels in intact skin mitochondria, the levels in melanoma mitochondria were 7.0 times lower at week 1, 10.0 times lower at week 2, and 17.0 times lower at week 3.

CONCLUSION: Early nitrosative stress was detected in the cardiac mitochondria of female mice, highlighting the vulnerability of the cardiovascular system during malignancy. A progressive decrease in nitrotyrosine levels was detected in the mitochondria of tumor cells, skin, and brain, likely reflecting complex adaptive and pathophysiological processes during malignant tumor growth in the body, which require further study.

Full Text

Митохондриальный нитрозативный стресс в органах мышей-самок при росте меланомы В16/F10, органоспецифические изменения

 

И.В. Нескубина1, Е.М. Франциянц1, Е.И. Сурикова1, А.И. Шихлярова1, В.А. Бандовкина1, Л.К. Трепитаки1, Л.А. Немашкалова1, В.Е. Сушко1, И.М. Попова2, А.Е. Шумарин2, Ю.А. Геворкян1, Ю.С. Шатова1

1Национальный медицинский исследовательский центр онкологии», Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

2Ростовский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону, Российская Федерация

* neskubina.irina@mail.ru.

ОБОСНОВАНИЕ

Меланома — это разновидность рака кожи, возникающая из меланоцитов и характеризующаяся генетическими мутациями и эпигенетическими изменениями, которые способствуют прогрессированию опухоли, включая неоангиогенез, неконтролируемую пролиферацию, инвазию в ткани, уклонение от иммунного ответа и устойчивость к гибели клеток [1]. Меланома занимает пятое место среди самых распространённых видов рака в мире, а уровень заболеваемости в мире оценивается в 2,8–3,1 случая на 100 000 человек [2]. Хотя на меланому приходится всего 1% всех случаев рака кожи в мире, но 80% смертей от рака кожи происходит из-за её агрессивной природы [3].

 Окислительный и нитрозативный стресс играют ключевую роль в развитии многих патологических состояний, в том числе и в возникновении злокачественных опухолей [4]. Образование и удаление свободных радикалов в живой системе происходят в идеальном равновесии, если один из этапов достижения этого баланса прерывается, то развивается окислительный стресс, который может привести к повреждению клеток [5]. Реакция между супероксид-ионом и оксидом азота (NO) протекает со скоростью, приводящей к почти мгновенному образованию пероксинитрита вместо нитритов, нитратов или перекиси водорода [6]. Пероксинитрит, в свою очередь, инициирует образование 3-нитротирозина (3-NT) посредством взаимодействия с остатками тирозина белка или свободным тирозином [7, 8]. Нитротирозин является надежным биомаркером нитрозативного стресса, при этом сам может нарушать функцию белков, влияя на клеточную сигнализацию, метаболизм и выживаемость клеток. Роль нитрации тирозина исследовалась в патогенезе различных заболеваний и было сформировано мнение о том, что нитрозативный стресс способствует высокому риску развития сердечно-сосудистых патологий, острому повреждению почек, диабетическим ретинопатиям, злокачественным новообразованиям и т.д. [9, 10].

При злокачественном процессе нитрозативный стресс приобретает системный характер воздействуя на различные органы и ткани [11, 12]. Особый интерес в аспекте развития злокачественных опухолей представляют митохондрии, являющиеся не только основным источником, но и ключевой мишенью активных форм кислорода и азота [13]. Несмотря на признанную роль оксидативного стресса в онкологии, динамика и специфика митохондриального нитрозативного стресса в различных органах в процессе прогрессии опухоли остаются малоизученными. В частности, неясно, как рост опухоли влияет на уровень нитротирозина в митохондриях критически важных органов, таких как сердце и мозг, и каким образом это взаимосвязано с метаболизмом самой опухоли.

Для изучения митохондриальной дисфункции при многих патологических процессах целесообразно использование доклинических инструментов, таких как экспериментальные модели [14, 15]. Моделирование опухолевой прогрессии различного гистологического вида на экспериментальных животных предоставляет возможность детальной всесторонней патогенетической оценки течения заболевания. В связи с вышесказанным использование модели меланомы представляется особенно целесообразным, поскольку данный вид опухоли обладает высокой агрессивностью и способностью оказывать системное влияние на организм [16, 17].

Цель. Изучить содержание нитротирозина в митохондриях клеток различных органов и тканей (мозг, сердце, печень, почки, кожа, опухоль) мышей-самок линии С57ВL/6 на этапах роста экспериментальной меланомы В16/F10.

Материалы и методы

Проводилось рандомизированное контролируемое исследование на мышах-самках линии С57ВL/6 (n=84) 8 недельного возраста с начальной массой 20-22 г. Животные в исследование были включены методом случайной выборки по массе тела так, чтобы индивидуальный вес тела входил в диапазон вариации ± 10%. Мыши линии С57ВL/6 были получены из ФГБУ МНИЦ Научный центр биомедицинских технологий «Андреевка» ФМБА (Московская область). В работе использовали клеточную линию мышиной меланомы В16/F10, метастазирующую в легкие. Опухолевый штамм получен из ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Работа с животными проводилась в соответствии с правилами «Европейской конвенции о защите животных, используемых в экспериментах» (Директива 86/609/ЕЕС) и Хельсинкской декларации, а также в соответствии с "Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных" и приказом Минздравсоцразвития России от 23.08.2010 г. № 708Н "Об утверждении правил лабораторной практики". Животные содержались при естественном режиме освещения со свободным доступом к воде и пище. Комиссией по биоэтике ФГБУ «НМИЦ онкологии» Минздрава России от 31. 05. 2018, был одобрен протокол исследования (протокол этического комитета №2). Манипуляции с животными производили в боксе с соблюдением общепринятых правил асептики и антисептики.

Животные (n=84) были распределены методом случайной выборки на следующие экспериментальные группы: интактная группа (n=21) и основная группа (n=63) – мыши со стандартной подкожной перевивкой меланомы (В16/F10).

Мышам группы сравнения (В16/F10) подкожно под правую лопатку вводили 0,5 мл взвеси опухолевых клеток меланомы В16/F10 в физиологическом растворе (2,7х106 клеток), подсчет клеток производили на анализаторе ADAMIILS (Nano Entek, Korea). Декапитировали мышей на гильотине. Животных из группы сравнения декапитировали в следующие сроки роста экспериментальной меланомы В16/F10: 1-я неделя -7 день роста, 2-я неделя - 14 день роста и 3-я неделя -21 день роста.

После декапитации у животных с использованием хладагентов быстро иссекали опухоль и кожу на максимальном удалении от опухолевого очага. Извлекали мозг, печень, почки, сердце. Митохондрии выделяли по методу [18, 19] с применением дифференциального центрифугирования на высокоскоростной рефрижераторной центрифуге Avanti J-E, BECMAN COULTER, USA. Ткани промывали ледяным 0,9% раствором KCl. Для разрушения межклеточных связей, клеточной стенки и плазматических мембран применяли механическую обработку тканей с измельчением ножницами и гомогенизацией в стеклянном гомогенизаторе с тефлоновым пестиком (гомогенизатор Поттера-Эльвегейма). На каждый грамм ткани добавляли по 10 мл среды выделения (0,22 М маннитол, 0,3 М сахароза, 1мМ ЭДТА, 2 мМ TRIS-HCL, 10мМ HEPES, pH 7,4). Ткани гомогенизировали и центрифугировали первый раз 10 мин при скорости 1000 g, температура 0-2 °С, второе и третье центрифугирование осуществляется при 20000 g, 20 мин, температура 0-2 °С. Между центрифугированием проводили процедуру ресуспендирования осадка митохондрий в среде выделения. Митохондрии дополнительно очищали от лизосом, пероксисом, меланосом и т.п., центрифугируя в 23% градиенте Перколла. Суспензию субклеточных структур наслаивали на градиент Перколла, центрифугировали 15 мин при 21000 g, после этого наблюдалось разделение на 3 фазы, оставляли нижний слой митохондрий и ресуспендировали средой выделения. Следующую промывку митохондрий осуществляли путем центрифугирования в течение 10 мин при 15000 g, температура 0-2 °С.

Полученные митохондриальные образцы (концентрация белка 4-6 г/л) до анализа хранили при -80ºС в среде выделения. Белок (г/л) определяли биуретовым методом (Ольвекс Диагностикум, Россия) на спектрофотометре (Hitachi U-2900 Japan). В митохондриальных образцах с помощью тест-систем на ИФА-анализаторе (Infinite F50 Tecan, Austria) определяли концентрацию нитротирозина (нМоль/г белка) (Hycult Biotech, Netherlands).

Размер выборки был определен в соответствии с правилами по использованию животных для проведения медико-биологических исследований и одобрен этическим комитетом ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации. Статистический анализ результатов проводили с помощью пакета программ Statistica 10.0. Полученные данные подвергали анализу на соответствие распределения признаков нормальному закону распределения с использованием критерия Шапиро-Уилка (для малых выборок). Сравнение количественных данных в группах (независимые выборки) проводили с использованием критериев Стьюдента. Данные таблиц представлены в виде M±m, где M - среднее арифметическое значение, m - стандартная ошибка среднего, за уровень статистической значимости принимали р<0,05. Полученные результаты статистически обрабатывали с соблюдением общих рекомендаций для медицинских исследований.

Результаты

Результаты эксперимента по изучению уровня нитротирозина в митохондриях клеток различных органов и меланомы у мышей-самок линии С57ВL/6 представлены в таблице.

При изучении нитротирозина в митохондриях клеток органов интактных самок найдено, что содержание данного показателя в мозге, сердце и печени находилось в одном числовом диапазоне, и было в среднем ниже, чем в митохондриях кожи в 2,7 раза, а по сравнению с величинами в митохондриях почек в 4,4 раза.

Таблица 1

Динамика уровня нитротирозина (нмоль/г белка) в митохондриях органов самок мышей линии С57ВL/6 при стандартном и стимулированном росте меланомы B16/F10

 

Показатель

Орган

Опухоль

мозг

печень

сердце

почки

кожа

Интактная

27,228±1,634

29,3±2,277

29,3±2,519

125,55±10,900

76,451±4,813

-

М

1 неделя

28,721±3,853

27,16±3,888

29,312±3,331

112,88±11,255

52,78±7,040

р1=0,0167

10,875±1,427

р1=0,0000

М

2 неделя

19,27±1,553 р1=0,0041

р2=0,0421

21,975±1,522

р1=0,0114

34,197±4,256

95,88±7,258

р1=0,0428

50,456±6,317

р1=0,0066

7,703±0875

р1=0,0000

 

М

3 неделя

13,96±0,889

р1=0,0124

р2=0,0028

р3=0,0218

24,412±2,231

25,307±2,792

103,37±10,695

9,655+±0,854

р1=0,0000

р2=0,0066

р3=0,0000

4,484±0,359

р1=0,0000

р2=0,0009

р3=0,0052

Примечание. 1 – статистически значимо по отношению к показателю в интактной группе; 2 - статистически значимо по отношению к показателю на 1 неделе роста меланомы; 3 - статистически значимо по отношению к показателю на 2 неделе роста меланомы.

Через 1 неделю роста меланомы у мышей-самок изменения уровня нитротирозина зарегистрированы в митохондриях клеток кожи – показатель снизился в 1,4 раза (р<0,05) по сравнению со значениями в интактных митохондриях клеток кожи. Не найдено статистически значимых изменений уровня нитротирозина в митохондриях клеток мозга, печени, сердца и почек.

Через 2 недели опухолевого роста у самок мышей в митохондриях мозга, печени, почек и кожи найдено статистически значимое снижение уровня ниротирозина в 1,4 раза (р<0,05), 1,3 раза (р<0,05), 1,3 раза (р<0,05) и 1,5 раза (р<0,05) относительно соответствующего показателя в интактных митохондриях. В этот срок не установлено статистически значимых изменений в митохондриях клеток сердца.

Через 3 недели роста меланомы у самок мышей фиксировали статистически значимые изменения нитротирозина в митохондриях мозга и кожи по сравнению с величинами в соответствующих интактных митохондриях. Так, в митохондриях мозга уровень нитротирозина был ниже в 2,0 раза, а в митохондриях кожи снижение показателя было более существенным – в 8,0 раза. На данном этапе роста опухоли отмечали статистически значимые различия в изменении уровня нитротирозина по сравнению со значениями на предыдущих этапах развития меланомы: в митохондриях клеток мозга данный показатель был ниже соответствующего уровня на 1 неделе роста меланомы в 2,0 раза, на 2 неделе – в 1,6 раза (р<0,05). Самое значимое снижение уровня нитротирозина по сравнению с предыдущими сроками развития меланомы отмечали в митохондриях кожи и установили, что по сравнению с величинами показателя на 1 недели к 3 неделе он снизился в 5,5 раза и по сравнению со значениями на 2 неделе, он был ниже в 5,2 раза.

Особое внимание было обращено на динамику уровня нитротирозина в митохондриях клеток меланомы на всех изучаемых сроках развития опухоли. Прежде всего, отмечали прогрессивное снижение уровня нитротирозина по мере развития меланомы вплоть до 3 недели включительно. По сравнению со значениями нитротирозина в митохондриях интактной кожи фиксировали его более низкие значения на 1 неделе в 7,0 раза, на 2 неделе в 10,0 раза и на 3 неделе в 17,0 раз.

Таким образом, показано, что рост меланомы у мышей-самок не оказывал влияние на уровень нитротирозина в митохондриях клеток печени и сердца. Вместе с тем значимые изменения найдены в содержании нитротирозина в митохондриях клеток мозга, кожи и меланомы.

Обсуждение

По результатам исследования по изучению уровня нитротирозина в митохондриях клеток всех исследуемых органах и тканях у мышей-самок на этапах роста меланомы В16/F10 были зафиксированы несколько значимых фактов, которые вызвали определенный интерес, а именно: распределение нитротирозина в интактных митохондриях клеток изучаемых органов имеет тканевую специфичность. Далее, установлено резкое снижение нитротирозина в митохондриях органа-мишени для меланомы – коже в терминальном периоде роста опухоли. В то же время в митохондриях опухоли по мере развития меланомы – прогрессивное снижение показателя и в результате значения нитротирозина на 3 неделе опухолевой прогрессии существенно снизились, величина показателя была ниже значений в интактных митохондриях всех органов. Следующий факт, привлекший внимание – в митохондриях клеток мозга присутствовала аналогичная ситуация, как и в митохондриях кожи – резкое снижение на терминальном этапе. Обнаруженные данные, бесспорно, требуют объяснений, поэтому разберем по порядку.

В настоящем эксперименте в процессе подкожного развития меланомы у мышей-самок к 3 недели опухолевой прогрессии происходила инвазия опухоли, затрагивающая все слои кожи.

Из литературных данных известно, что густая сеть нервных волокон иннервирует все слои и придатки кожи. Периферические сенсорные нейроны постоянно передают подробную информацию из кожи в ЦНС, где вырабатываются оптимальные ответы, и сенсорные сигналы, возникающие при прикосновении, температуре, вибрации, боли и зуде, передаются в соответствии с активированными классами нейронов и их паттернами разряда. Поток информации в обратном направлении поддерживается эфферентными вегетативными нейронами, которые контролируют перфузию кожи, но также являются эффекторами стресса [20].

Учитывая тесную взаимосвязь кожи и мозга через сеть нервных волокон, и в связи с идентичностью ситуации, сложившейся в митохондриях кожи и мозга – низкое содержание нитротирозина на терминальном этапе развития меланомы, можно предположить существование некоторой взаимосвязи в регуляции количества нитротирозина в митохондриях кожи и мозга, которое, по всей видимости, может свидетельствовать о механизме периферической передачи патологической информации в мозг из органа, пораженного опухолью. Кроме того, анатомическая топография подкожного роста опухоли и низкие уровни нитротирозина в митохондриях меланомы склоняют к мысли о вероятной многовекторной координации взаимовлияния митохондрий мозга, кожи и опухоли.  

Современные исследования выявили, что сенсорные и эфферентные модули состоят из ансамблей нейронных и не нейронных клеток, которые взаимодействуют друг с другом сложным образом, кодируя и контролируя локальные эфферентные реакции. Более того, такое взаимодействие также обеспечивает основу для двунаправленной коммуникации, связывающей с локальным гомеостазом, трофическими функциями и иммуномодуляцией, включая их базовую физиологию и специфическую роль в патофизиологии [20].

В последние годы нейробиология рака привлекает к себе значительное внимание [13]. Исследования, изучающие влияние нервной системы на различные виды рака, показали, что инфильтрирующие опухоль нейроны играют важнейшую роль в контроле агрессивности рака, в том числе в поддержке метаболизма раковых клеток посредством прямых метаболических взаимодействий. Эти исследования продемонстрировали существование зависимости метаболизма раковых клеток от нервной системы и предположили существование механизмов метаболической поддержки, действующих на границе между нервной системой и раковыми клетками [21]. Вместе с тем было показано, что ассоциированные с раком нейроны являются важным источником митохондрий, которые передаются раковым клеткам, вызывая их метаболическое перепрограммирование и повышая потенциал стволовых клеток. Авторы установили, что нейроны могут быть особенно эффективными донорами митохондрий, вероятно, благодаря большому количеству митохондрий в них и возникновению прочных контактов на границе между нервной тканью и раком [13].

По всей видимости, имеет место вовлечение нейро-кожных осей регуляции метаболизма в системный ответ организма на опухолевую прогрессию с уклонением от нитрозативного стресса, однако для полного понимания и раскрытия данного предположения требуются дальнейшие изыскания.

В ходе настоящего исследования была определена стабильность уровня нитротирозина в митохондриях клеток печени, сердца и почек на всех этапах эксперимента, что, по всей видимости, свидетельствует о высокой эффективности их антиоксидантной системы и устойчивости к нитрозативному стрессу при росте меланомы у мышей-самок.

 

Заключение

Удалось обнаружить органы (печень, сердце, почки), в которых митохондрии клеток были устойчивы к нитрозативному стрессу. В митохондриях клеток опухоли, кожи и мозге установлено прогрессирующее снижение нитротиразина, что, вероятно, отражает сложные адаптационные и патофизиологические процессы при росте злокачественной опухоли в организме, требующие дальнейшего изучения.

×

References

  1. Chaiprasongsuk A, Panich U. Role of phytochemicals in skin photoprotection via Nrf2 regulation. Front Pharmacol. 2022;12(13):823881. doi: 10.3389/fphar.2022.823881
  2. Siegel RL, Giaquinto AN, Jemal A. Cancer incidence statistics. CA Cancer J Clin. 2024;74(1):12-49. doi: 10.3322/caac.21820
  3. Ossio R, Roldan-Marin R, Martinez-Said H, et al. Melanoma: a global perspective. Nat Rev Cancer. 2017;17(7):393-394. doi: 10.1038/nrc.2017.43
  4. San-Millán I. The Key Role of Mitochondrial Function in Health and Disease. Antioxidants (Basel). 2023;12(4):782. doi: 10.3390/antiox12040782
  5. Ramazan ZK, Sarı İ, Yıldırım BG, et al. Evaluation of oxidative stress, 3-Nitrotyrosine, and HMGB-1 levels in patients with wet type Age-Related Macular Degeneration. J Med Biochem. 2022;41(3):275-281. doi: 10.5937/jomb0-32189
  6. Qian J, You H, Zhu Q, et al. Nitrotyrosine level was associated with mortality in patients with acute kidney injury. PLoS One. 2013;8(11):e79962. doi: 10.1371/journal.pone.0079962
  7. Masahiro H, Suzuki K, Kassai Y, et al. 3-Nitrotyrosine shortens axons of non-dopaminergic neurons by inhibiting mitochondrial motility. Neurochem Int. 2024;179:105832. doi: 10.1016/j.neuint.2024.105832
  8. Quevedo-Abeledo JC, Hernández-Díaz M, García-González M, et al. Serum 3-Nitrotyrosine in the cardiovascular disease of patients with systemic lupus erythematosus. Antioxidants. 2025,14(6):739. doi: 10.3390/antiox14060739
  9. Ramazan ZK, Sarı İ, Yıldırım BG, et al. Evaluation of oxidative stress, 3-Nitrotyrosine, and HMGB-1 levels in patients with wet type age-related macular degeneration. J Med Biochem. 2022;41(3):275-281. doi: 10.5937/jomb0-32189
  10. Bandookwala M, Sengupta P. 3-Nitrotyrosine: a versatile oxidative stress biomarker for major neurodegenerative diseases. Int J Neurosci. 2020;130(10):1047-1062. doi: 10.1080/00207454.2020.1713776
  11. Kit OI, Kotieva IM, Frantsiyants EM, et al. Influence of chronic neurogenic pain on the dynamics of the no-system functioning during melanoma B16/F10 growth in male mice. Siberian Journal of Oncology. 2021;20(3):67–75. (In Russ.). doi: 10.21294/1814-4861-2021-20-3-67-75. EDN: ZFZBYF
  12. Milaeva ER, SHpakovskij DB, Radchenko EV, et al. Olovoorganicheskoe soedinenie - ingibitor obrazovaniya oksida azota (II). Izvestiya Akademii nauk. Seriya himicheskaya. 2022;71(12):2605-2611. (In Russ.). EDN: ZFZBYF
  13. Hoover G, Gilbert S, Curley O, Obellianne C, Lin MT, Hixson W, et al. Nerve-to-cancer transfer of mitochondria during cancer metastasis. Nature. 2025;644(8075):252-262. doi: 10.1038/s41586-025-09176-8
  14. Kit OI, Shikhlyarova AI, Frantsiyants EM, et al. Processes of mitochondrial self-organization in experimental tumor growth with chronic neurogenic pain. Bulletin of higher educational institutions. north caucasus region. Natural sciences. 2019;2(202):97-105. (In Russ.). doi: 10.23683/0321-3005-2019-2-97-105. EDN: NNMLPK
  15. Frantsiyants EM, Kaplieva IV, Bondovkina VA, et al. Modeling of multiple primary malignant tumors in experiment. South Russian Journal of Cancer. 2022; 3(2): 14-21. (In Russ.). doi: 10.37748/2686-9039-2022-3-2-2. EDN: STZAHL
  16. Frantsiyants E M, Neskubina IV, Cheryarina ND, et al. Influence of B16/F10 melanoma growth variant on the level of cytochrome C in mitochondria in various organs of female mice. The Scientific Notes of Pavlov University. 2020;27(4):46–52. (In Russ.). doi: 10.24884/1607-4181-2020-27-4-46-52. EDN: KCLLKC
  17. Dodokhova MA, Akimenko MA, Voronova OV, et al. Comparative analysis of the use of B16 melanoma and epidermoid Lewis lung carcinoma models for preclinical studies of compounds with a putative antitumor effect. Ural Medical Journal. 2023;22(5):66-76. (In Russ.). doi: 10.52420/2071-5943-2023-22-5-66-76. EDN: TRHPUN
  18. Egorova MV, Afanas'ev SA. Vydelenie mitohondrij iz kletok i tkanej zhivotnyh i cheloveka: Sovremennye metodicheskie priemy. Sibirskij medicinskij zhurnal. 2011;26(1-1):22-28. (In Russ.). EDN: NHHOZX
  19. Gureev AP, Kokina AV, Syromyatnikov MYu, et al. Optimization of methods for the mitochondria isolation from different mice tissues. Proceedings of Voronezh State University. Series: Chemistry. Biology. Pharmacy. 2015;4:61–65. (In Russ.). EDN: VWNFBH
  20. Ständer S, Schmelz M. Skin Innervation. J Invest Dermatol. 2024;144(8):1716-1723. doi: 10.1016/j.jid.2023.10.047
  21. Ayala G. Neuroepithelial interactions in cancer. Annu. Rev. Pathol. 2023;18:493-514. doi: 10.1146/annurev-pathmechdis-031521-023248

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) Eco-Vector

License URL: https://eco-vector.com/for_authors.php#07
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС 77 - 86496 от 11.12.2023 г. 
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ЭЛ № ФС 77 - 80673 от 23.03.2021 г.