Proliferative and apoptotic processes in peritumoral area of kidney cancer

Abstract

Full Text

Клеточные и биомолекулярные взаимодействия в ткани, непосредственно окружающей новообразование, очень важны для понимания механизмов прогрессии и рецидивирования опухолевого процесса. Цель исследования - иммуногистохимическое (ИГХ) исследование процессов пролиферации и апоптоза в эпителии канальцев перитуморозной зоны (ПЗ) почечно-клеточного рака (ПКР). Материал и методы. Изучен операционный материал 42 больных ПКР. Средний возраст пациентов составил 57,4±1,4 года. Мужчин было 25 (59,5%), женщин - 17 (40,5%). Материал забирали из центра опухоли, ПЗ (за ПЗ принимали ткань от края опухоли до условно неизмененной паренхимы почки) и неизмененной ткани почки, забранной из максимально отдаленных от опухоли участков. Больные были разделены на 2 группы. В 1-ю группу вошли пациенты с опухолями степени злокачественности G I - II и отсутствием метастазов, 2-ю группу составили больные с карциномами степени злокачественности G III - IV и наличием метастазов. Экспрессию маркеров р53 (клон DO- 7, DAKO), Bcl-2 (клон 124, DAKO), CD31 (клон JC70A DAKO) и Ki-67 (клон MIB-1,DAKO) определяли при помощи ИГХ-метода по протоколам, рекомендованным производителями. Интенсивность ИГХ-окрашивания р53 оценивали как негативную (нет окрашивания), слабо позитивную (< 5% окрашенных клеток), умеренно позитивную (> 5% средней интенсивности окраски) и сильно позитивную (> 5% высокой интенсивности окраски). При оценке ИГХ-окрашивания bcl-2 использовали полуколичественный метод: 0 баллов - отсутствие окрашивания; + (1 балл) - более 20% клеток со слабой интенсивностью окрашивания цитоплазмы; ++ (2 балла) - умеренное окрашивание цитоплазмы; +++ (3 балла) - интенсивное окрашивание цитоплазмы; ++++ (4 балла) - интенсивное окрашивание цитоплазмы более чем 80% клеток. В тех случаях, когда интенсивность окрашивания варьировала, например от + (1 балл) до ++ (2 балла), получали среднее - 1,5 балла. Подсчет индекса мечения (ИМ) Ki-67 проводили на 1000 клеток на цифровых микрофотографиях с помощью морфометрической программы Image Tool 3.0. с последующим выражением результата в процентах. Статистическую обработку материала проводили при помощи статистического пакета Statistica 6.0. Результаты. При ИГХ-исследовании ткани почки, взятой из максимально удаленных от опухоли участков, в канальцевом эпителии ИМ Ki-67 колебался от 0 до 8% (в среднем 1,6±0,6%). При этом в почках больных 1-й группы ИМ Ki-67 составил 1,0±0,4%, а во 2-й группе возрастал до 2,9±1,1% (p < 0,05). ИМ Ki-67 в эпителии канальцев ПЗ 1-й группы варьировал в пределах от 0 до 3% и в среднем составил 1,8±0,5, а во 2-й группе возрастал до 3,5±0,9, пределы колебаний составили от 0 до 8%. Экспрессию ингибитора апоптоза bcl-2 в неизмененной ткани почки обнаруживали во всех случаях, и ее интенсивность в среднем составила на 1,8±0,1 балла. Результаты ИГХ-окрашивания bcl-2 эпителия канальцев ПЗ в 1-й группе больных либо отрицательны (0 баллов), либо отмечали слабую окраску (1 балл), а в ПЗ 2-й группы экспрессия маркера в эпителии во всех случаях была интенсивной (3 и 4 балла). При исследовании экспрессии белка-активатора апоптоза р53 в неизмененной ткани почки ИГХ-окрашивание маркера обнаруживали p53 во всех случаях, слабо позитивное окрашивание отмечали в 86,9% случаев, умеренно позитивное - в 13,1% случаев. ИГХ-окрашивание ядер клеток эпителия канальцев ПЗ на р53 в 1-й группе пациентов в 9,1% случаев было негативным, в 72,7% слабо позитивным, в 9,1% умеренно позитивным и в 9,1% сильно позитивным. Во 2-й группе исследования негативной реакции отмечено не было, слабо позитивное окрашивание отмечали в 27,2% случаев, умеренно позитивное - в 36,4% и сильно позитивное в 36,4%. Заключение. Проведенное исследование позволило выявить в ПЗ ПКР явления ренальной интрату- булярной неоплазии (РИН). Степень тяжести РИН зависела от биологических особенностей опухоли. В ПЗ опухолей высоких степеней злокачественности по сравнению с опухолями низких степеней злокачественности в тубулярном эпителия отмечали возрастание экспрессии Ki-67, р53 и bcl-2. Также следует отметить, что почка реагировала на рост злокачественной опухоли нарушением процессов пролиферации и апоптоза не только в ПЗ, но и во всей паренхиме в целом. Таким образом, в прилежащих к опухоли областях формируются очаги РИН, тяжесть которой непосредственно зависит от биологических особенностей опухоли, что следует учитывать при органосберегающих операциях при ПКР.