Argentophilic protein expression associated with argyrophilic nucleolar organiser regions (AgNOR) during kidney cancer

Abstract

Full Text

Аргентофильные белки С23 и B23 (нуклеолин и ну-клеофозмин), ассоциированные с областью ядрышкового организатора, ответственны за активизацию и контроль транскрипции рибосомных генов в клетке. Отличительным свойством этих белков является их способность выявляться нитратом серебра и поэтому количественные параметры аргентофилии ядрышка могут отражать пролиферативный потенциал клетки. В последние годы также показано, что белок С23 в опухолевых клетках взаимодействует с молекулами адгезии, что приводит к ослаблению межклеточных связей, кроме того нуклеолин может усиливать экспрессию матриксной металлопроте-иназы-9, что в целом способствует росту миграционной активности опухолевых клеток, их инвазии и метастази-рованию (Райхлин Н.Т. и соавт., 2010). Цель исследования — изучить активность AgNOR при почечно-клеточном раке (ПКР), выявить взаимосвязи с наиболее важными клинико-морфологическими факторами прогноза и послеоперационной выживаемостью больных. Материал и методы. Изучен операционный материал от 82 больных ПКР. Средний возраст пациентов составил 57,4 ± 1,1 года. Мужчин было 42 (51,2%), женщин - 40 (48,8%). Для определения активности ядрышковых организаторов гистологические срезы окрашивали нитратом серебра по двухступенчатому методу Y. Daskal и соавт. (1980) в нашей модификации (Бобров И.П. и соавт., 2010). В каждом случае подсчитывали среднее число гранул серебра (AgNORs) на 1 ядро в 25-30 клетках. Степень ядерной атипии клеток опухоли определяли по S. Fuhrman и соавт. (1982).Статистическая обработка материала проводилась с помощью статистического пакета Statistica 6.0. Построение кривых выживаемости проводили по методу Каплана - Мейера, достоверность различий показателей выживаемости оценивали с помощью log-rank-теста. Результаты и обсуждение. Разброс значений AgNORs среди всех больных составил от 1,9 до 34,5, среднее значение числа AgNORs на 1 ядро опухолевой клетки составило 8,7 ± 0,8 и медиана 5. При сопоставлении с важными клинико-анатомическими прогностическими параметрами ПКР были получены следующие корреляции количества AgNORs на 1 ядро: со степенью анаплазии (G) опухоли (r = 0,69; p = 0,0001); размером опухолевого узла (r = 0,60; p = 0,0001); наличием метастазов (r = 0,68; p = 0,0001) и стадией по TNM (r = 0,69; p = 0,0001). При анализе активности AgNORs в зависимости от стадии заболевания по TNM получены следующие результаты: у пациентов с I клинической стадией среднее значение AgNORs составило 4,8 ± 0,4; во II стадии число AgNORs возрастало до 8,2 ± 2,8 (p = 0,04); в III стадии количество AgNORs увеличивалось до 12,5 ± 1,9 (p = 0,36) и в IV стадии оно равнялось 17,3 ± 1,7 (p = 0,05). Таким образом, в III и IV стадиях отмечали достоверное увеличение AgNORs по сравнению с I стадией, а в IV стадии число AgNORs значимо возрастало по сравнению с III стадией патологического процесса. При размере опухолевого узла < 7 см число AgNORs равнялось 5,3 ± 0,6, а при размере > 7 см количество AgNORs в опухоли достоверно увеличивалось до 13,5 ± 1,4 (p = 0,0000001). В опухолях больных без регионарных и отдаленных метастазов содержание AgNORs составило 5,1 ± 0,4, а при наличие метастазов оно достоверно возрастало до 17,1 ± 1,2 (p = 0,0000001). При анализе активности AgNORs в зависимости от стадии заболевания по TNM получены следующие результаты: у пациентов с I стадией среднее значение AgNORs составило 4,8 ± 0,4; во II стадии число AgNORs возрастало до 8,2 ± 2,8 (p = 0,04); в III стадии количество AgNORs увеличивалось до 12,5 ± 1,9 (p = 0,36) и в IV стадии оно равнялось 17,3 ± 1,7 (p = 0,05). Таким образом, в III и IV стадиях отмечали достоверное увеличение AgNORs по сравнению с I стадией, а в IV стадии число AgNORs значимо возрастало по сравнению с III стадией патологического процесса. Нами проанализированы отдаленные результаты хирургического лечения у пациентов в зависимости от числа AgNORs в клетках опухоли. Поскольку при исследовании активности AgNORs медиана числа AgNORs в опухолевых клетках составила 5 AgNORs на 1 ядро, данное значение нами было взято за «критическую прогностическую точку», позволяющую разделить больных на 2 группы. В зависимости от числа AgNORs 1-ю группу составили опухоли с малым числом AgNORs на 1 ядро (< 5 AgNORs); 2-ю группу — опухоли c большим числом AgNORs на 1 ядро (> 5 AgNORs). В 1-й группе через год были живы 100% больных, через 2 года - 100% больных, через 3 года - 97,8%, через 4 года - 97,8%, через 5 лет - 97,8%. Во 2-й группе через год были живы 92,3% пациентов, через 2 года — 92,3%, через 3 года — 79,5%, через 4 года — 59%, через 5 лет — 56,4%. При анализе выживаемости по методу Каплана -Мейера обнаружено, что если число AgNORs в ядрышках клеток опухоли было < 5, то кумулятивная доля выживших к 1800-му дню составила 0,96, а когда число AgNORs было > 5, то кумулятивная доля выживших к 1800-му дню была равна 0,45. При проверке достоверности кривых выживания с помощью логарифмического рангового критерия было показано, что данные достоверны (log-rank-test; p = 0,0002). 33 РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, № 4, 2013 Заключение. Таким образом, результаты проведенного исследования показали, что число AgNORs в опухолевых клетках было взаимосвязано с рядом важных прогностических клинико-анатомических факторов ПКР и поэтому данный параметр может быть использован в качестве дополнительного фактора прогноза. Увеличение количества AgNORs в клетках опухоли можно рассматривать в качестве критерия вероятного возникновения метастазов опухоли. Выявлена взаимосвязь экспрессии AgNORs c 5-летней послеоперационной выживаемостью больных.