Pathomorphologi-cal and immune status features in patients with external urethral meatus polypus

Full Text

Заболевания уретры - довольно часто встречающаяся патология в практике врача уролога. Эта патология различна, начиная от заболеваний воспалительного характера до новообразований уретры. Если в настоящее время воспалительные заболевания уретры изучены достаточно хорошо и не вызывает сложностей их диагностика и соответственно лечение, то новообразования уретры изучены недостаточно и существует много вопросов, касающихся патогенеза данной патологии. Наиболее распространенными доброкачественными новообразованиями являются полипы уретры различной локализации [1, 2]. Настоящее исследование проведено с целью изучения полипов наружного отверстия уретры у женщин. Полип наружного отверстия уретры представляет округлое образование, плотно-эластической консистенции, имеющее гладкую поверхность. Размеры полипов различны, от нескольких миллиметров до 1,5-2 см. Клинические проявления разнообразные и зависят от размеров и локализации полипа: рези и жжение во время мочеиспускания, учащенное мочеиспускание, стран-гурия, посткоитальная уретроррагия, эпизоды острой задержки мочи [1, 3]. Несмотря на то что полип уретры не относится к тяжелым нарушениям здоровья, он способен значительно влиять на психический статус пациентки, снижать качество ее жизни. Полипы уретры с различной степенью клинической выраженности встречаются у 10-20% женщин, частота их с возрастом увеличивается. Чаще полипы уретры встречаются в возрасте 58-60 лет. Существует мнение, что на возникновение полипов мочеиспускательного канала у женщин влияет урогенитальная инфекция (хламидийная, микоплазменная), нарушение кровоснабжения стенки уретры в связи с генитальной атрофией, дисгормональные изменения в постменопаузе [1-5]. В настоящий момент вопрос об этиологической роли урогенитальной инфекции (Ur urealyticum. M. genita-lium, Ch. Trachomatis) в развитии полипов уретры остается дискутабельным. При этом одни авторы считают, что данная неспецифическая флора является причиной возникновения хронического уретрита и как следствие гиперплазии эпителия с развитием полипов. В последнее время возрастает интерес к изучению генитальных микоплазм, в том числе и Ureaplasma Urealiticum в патогенезе заболеваний мочеполовой системы [9-11]. Дан- ная тенденция обусловлена появлением новых методов диагностики: ПЦР и ее модификаций, цитогенетических методов (Fluorescence in situ hibridization), а также изучение патогенных свойств данного микроорганизма по отношению к мочеполовой системе человека, его вирулентности и устойчивости к противомикробной терапии. По мнению исследователей Ur. urealyticum выявляется у 70,2% женщин с заболеваниями мочеполовой системы, при этом в клинически значимой концентрации встречается у 94,1% из всех пациенток [7, 8]. При бессимптомном течении заболевания возможна дислокация флоры из влагалища в уретру и развитие хронического воспалительного процесса [6, 10]. Свидетельствует этому морфологическое строение полипа уретры, которое имеет картину хронического воспаления, и как следствие нарушение взаимоотношения пролиферирующего эпителия и соединительной ткани [12, 13]. Другие авторы говорят о спорной роли данной микрофлоры в возникновении полипов уретры. В данный момент имеется много вопросов о морфологических особенностях полипов уретры на фоне урогенитальной инфекции, изменении иммунного статуса организма у пациенток с данной патологией, особенностях патоморфологической картины в полипах уретры. Целью настоящего исследование стало изучение особенностей патоморфологической картины у пациенток с полипами уретры и выявленной урогенитальной инфекции (УГИ) и полипов неинфекционной этиологии, а также состояние иммунной системы у пациенток обеих групп. Материал и методы В основу настоящего исследования положены результаты обследования и лечения 150 пациенток с полипами наружного отверстия уретры, обратившихся за помощью в одну из клинических баз кафедры урологии и нефрологии. Возраст пациенток, принявших участие в исследовании, составил от 45 до 70 лет. Обследование пациенток включало сбор жалоб, анамнестических данных и лабораторные исследования. Для дальнейшего исследования 150 пациенток поделены на 2 группы. В 1-ю группу вошли 90 пациенток с полипами наружного отверстия уретры и выявленной при ПЦР и культуральном исследовании урогенитальной инфекцией, 2-ю группу составили пациентки с полипами неинфекционной этиологии. Для тестирования активности иммунных реакций при полипах уретры с выявленной УГИ и без таковой проведены специальные исследования, в которых проанализировали содержание про-(ФНОа и HH-1ß) и противовоспалительных (ИЛ-4) цитокинов в сыворотке крови данной категории боль- 37 РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, № 1, 2014 Содержание цитокинов ИЛ-lß, ИЛ-4 и ФНОа пах больных (X ± т) в 1-й и 2-й груп- Показатель Контрольная Пациентки с полипами уретры (n = 150) группа 1-я группа (n = 90) 2-я группа (n = 60) ИЛ-Щ пг/мл 47,2±1,3 130,2 ± 11,2 р = 0,004 р1 = 0,026 114,3 ± 9,7 р = 0,032 ИЛ-4, пг/мл 35,1 ± 0,8 57,2 ± 1,9 р = 0,044 р1 = 0,028 77,2 ± 3,1 р = 0,024 ФНОа, пг/мл 43,4 ± 1,6 116,5 ± 6,7 р = 0,004 р1 = 0,026 68,3 ± 2,8 р = 0,032 ФНОа/ИЛ-4, усл. ед. 1,3 ± 0,18 2,2 ± 1,4 р = 0,017 р1 = 0,003 0,9 ± 0,03 р = 0,026 ных. Содержание цитокинов ФНОа, HH-1ß и ИЛ-4 в сыворотке крови определяли методом иммунофермент-ного анализа с использованием реагентов ProCon («Протеиновый контур», Россия). После дообследования и предоперационной подготовки всем 150 пациенткам проведено хирургическое лечение. Полипы удалялись с помощью радио-волнового, электрохирургического прибора «Фотек Е 300» (Россия) с предварительной местной анестезией 2% раствором лидокаина и последующей коагуляцией ложа полипа. Патоморфологическое исследование проводилось при помощи световой и электронной микроскопии. Для световой микроскопии образцы фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином по ван-Гизону и Граму. Для электронной микроскопии образцы фиксировали в 4% параформальдегиде, постфикси-ровали в 1% растворе четырехокиси осмия и заливали в смесь эпона и аралдита. Полутонкие и ультратонкие срезы получали на ультратомах LKB III и Leica ULTRACUT EM UC7 (Leica, Германия). Полутонкие срезы окрашивали азуром II, ультратонкие - контрастировали уранилацетатом и цитратом свинца. Парафиновые и по-лутонкие срезы изучали в универсальном микроскопе Leica DM 4000B, фотографировали с помощью цифровой камеры Leica DFC320 и компьютерной программы Leica QWinV3. Ультратонкие срезы анализировали в электронном микроскопе JEM-1400, фотографировали с помощью цифровой камеры Veleta и программного обеспечения iTEM (Olympus). Результаты и обсуждение При анализе результатов бактериологического исследования соскобов из урогенитального тракта у 74 пациенток 1-й группы выявлена U. urealiticum в клинически значимых концентрациях 104-106К0Е/мл, а у 15 пациенток бактерионосительство U. urealiticum. При анализе результатов ПЦР исследования у всех пациенток 1-й группы обнаружена U. urealiticum в различных ассоциациях. При исследовании иммунного статуса данной группы пациенток впервые выявлено, что содержание HH-1ß, Рис. 1. Фрагмент полипа уретры пациентки З. Колонии уреаплазмы в поврежденном фибробласте. *12 000. ФНОа и ИЛ-4 в сыворотке крови здоровых людей (контрольная группа) в среднем составило 47,2 ± 1,3, 43,4 ± 1,6 и 35,1 ± 0,8 пкг/мл соответственно. Анализ результатов уровня провоспалительного цитокина HH-1ß в сыворотке периферической крови, представленный в таблице, выявил, что у больных 1-й и 2-й групп данный показатель статистически значимо превышает соответствующее значение у здоровых людей. Однако у больных 1-й группы был зафиксирован максимальный уровень провоспали-тельного цитокина HH-1ß в сыворотке периферической крови. Среднее значение данного цитокина было в 2,7 раза выше (p < 0,001), чем в контрольной группе, и на 12,2% (p < 0,05) выше, чем во 2-й группе. Уровень провоспалительного цитокина ФНОа в 1-й группе в 2,7 раза (p < 0,001) превышал данный показатель в группе контроля и в 1,7 был выше по сравнению со 2-й группой пациенток. Уровень противовоспалительного цитокина ИЛ-4 в сыворотке крови больных 1-й группы был на 21,2% выше (p < 0,05), чем у пациенток контрольной группы. В то же время уровень данного цитокина в сыворотке крови у больных 2-й группы был на 34,9% выше (p < 0,05), чем у больных 1-й группы, а также в 2,2 раза выше (p < 0,05), чем у здоровых доноров. Индекс соотношения ФНо/ИЛ-4 у больных 1-й группы превышал контрольное значение на 59% (p < 0,05). В то же время у больных 2-й группы данный показатель был на 30,7% ниже, чем в контрольной группе, и на 41% ниже, чем в 1-й группе пациенток (в обоих случаях p < 0,05). При анализе результатов световой микроскопии ткани полипов у пациенток 1-й группы наблюдалась рыхлая соединительная или фиброзная ткань с развитой капиллярно-венозной сетью. Сосуды венозных сплетений расширены, полнокровные, стенки вен скле-розированы. В строме инфицированных полипов определялся хронический, продуктивный, воспалительный инфильтрат, состоящий из лимфоцитов, плазмоцитов, с примесью лейкоцитов. Инфильтрат располагался в строме диффузно, часто с образованием лимфоидных фолликулов. В эпителиальной выстилке наблюдались деструктивные, метапластические, и диспластические изменения. Деструктивные изменения сочетались с очагами лейкоплакии и дисплазии в плоском многослойном, неороговевающем эпителии, что явилось морфологической особенностью изучаемых образцов, свидетельствующих о пролиферативном типе воспалительных изменений. При электронно-микроскопическом исследовании клеточные элементы соединительной ткани полипов уретры характеризовались умеренным полиморфиз- 38 КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Рис. 2. Фрагмент полипа уретры пациентки Г. Колонии уреаплазмы в поврежденном фибробласте. *15 000. мом ультраструктурной организации. Наиболее выраженным изменениям были подвержены плазматические клетки, в цитоплазме которых локализовались мелкие электронно-плотные ассоциации U. urealiticum (рис. 1). Микроорганизмы имели вид округлой или овальной вакуоли с хлопьевидным осмиофильным содержимым варьирующей электронной плотности. Они свободно располагались в цитоплазматическом матриксе и были приурочены к канальцам перинуклеарной гранулярной цитоплазматической сети. В инфицированных плазматических клетках был значительно редуцирован белок-синтезирующий компартмент, мембраны митохондрий вакуолизированы, и плазмоциты утрачивали специфичные ультраструктурные особенности (рис. 2), превращаясь в резервуар для персистенции и репродукции внутриклеточных «колонистов», как правило, не подвергаясь цитодеструкции. В этих условиях другие популяции соединительнотканных клеток демонстрировали умеренно повышенную функциональную активность с возрастанием доли цитоплазматического компартмента в ядерно-цитоплазматическом соотношении. Заключение В патогенезе полипов наружного отверстия уретры у женщин одна из важных ролей принадлежит урогенитальной инфекции (U. urealiticum), которая проникая в уротелий, способствует развитию патоморфологических изменений ее структуры и развитию воспалительного процесса. По результатам исследования иммунитета у пациенток с полипами уретры и выявленной УГИ наблюдался наибольший рост уровня провоспалительного цитокина ИЛ-iß и ФНОа в сыворотке крови, что подтверждает выраженность воспалительного процесса в полипе уретры, по сравнению с пациентками группы без выявленной УГИ. В то же время наибольший уровень противовоспалительного цитокина (ИЛ-4) выявлен у больных с полипами уретры без УГИ, что подтверждается высокой степенью фиброзно-железистых процессов в ткани полипа уретры и свидетельствует о компенсаторном росте ИЛ-4 на фоне достаточно высоких значений ФНОа. Наряду с этим более высокое значение индекса соотношения про- и противовоспалительных цитокинов у больных с полипами уретры с выявленной УГИ указывает на более выраженную активность воспалительного процесса в отличие от пациенток с полипами уретры неинфекционной этиологии. Патоморфологическое исследование полипов уретры в условиях УГИ показало пролиферативный характер ремоделирования покровного эпителия с гиперплазией, акантозом, ороговением многослойного плоского эпителия и синхронными изменениями подлежащей соединительной ткани - нарушениями микроциркуляции и формированием диффузных массивных воспалительно-клеточных инфильтратов. Трансэпителиальный лейкопедез сопровождался дистрофическими изменениями эпителиоцитов и пролиферацией базальных клеток. При электронной микроскопии недифференцированные одиночные микробные тельца и колонии микоплазм локализовались в плазматических клетках и фибробластах с редуцированными белоксинтезирую-щими органеллами.

About the authors

A. V Yakovlev

The Altai State Medical University

Email: andyakovlev@mail.ru
656038, Barnaul, Russian Federation

A. I Neymark

The Altai State Medical University

656038, Barnaul, Russian Federation

D. E Semenov

”Scientific-Research Institute of Regional Pathology and Pathomorphology” Siberian Department of the Russian Academy of Medical Sciences

630117, Novosibirsk, Russian Federation

References

Supplementary files