Analysis of matrix metalloproteinases inhibition effectiveness: assessment of changes in volume of units in the primary tumor during selective inhibition of MMP -9 and non-selective inhibition of MMP -9 and MMP -13 on models of skin melanoma IN VIVO

Abstract

Full Text

Многие клинические работы подтверждают важную роль матриксных металлопротеиназ (ММП) в развитии опухолей. ММП-9 (желатиназа В) обеспечивает ангиогенез в опухолевой ткани, тем самым способствуя ее росту (Клишо Е.В. и соавт., 2003). Но большинство ММП выделяются не раковыми клетками непосредственно, а клетками стромы вокруг опухоли. Поскольку в формировании опухоли важную роль играет стромальная окружающая среда, то ММП, изменяя ее, могут вносить вклад в развитие рака на начальных стадиях (Sternlicht M. и соавт., 2000). Например, ММП-13, также известная как коллагеназа-3, обладает широкой субстратной специфичностью и играет важную роль в инвазии и метастазировании опухолей. ММП-13 впервые была обнаружена в строме опухолей молочной железы и не определялась в эпителии как нормальной, так и опухолевой ткани (Blasi F., Stoppelli M., 1998). Возможно, что опухолевые клетки, секретируя различные полипептиды, способны стимулировать продукцию ММП-13 фи-бробластами - клетками стромы. Опухолевая индукция секреции этой металлопротеиназы фибробластами представляет еще один пример комплексных взаимодействий, встречающихся между стромальными и раковыми клетками при прогрессии опухоли. Цель исследования — оценить изменения объемов первичных опухолевых узлов в эксперименте в условиях селективного ингибирования ММП-9 и неселективного ингибирования ММП-9 и ММП-13 на модели меланомы in vivo. Материал и методы. Мыши линии C57Bl6, половозрелые самки в возрасте 8—10 нед, массой от 19 до 26 г с перевитой меланомой В16; 3 группы — контрольная и 2 опытных по 7 в каждой группе. На 14-й день после трансплантации опухолевых клеток, животным в опытных группах начата терапия ингибитором ММП-9 (MMP-9 Inhibitor I, производитель — "Calbiochem", США) в различных дозировках - для селективного ингибирования ММП-9 в 1-й опытной группе и неселективного ингибирования ММП-9 и ММП-13 во 2-й опытной группе. Препарат вводился внутримышечно 1 раз в день в течение 7 дней. Оценка объема опухолевого узла проводилась 1 раз в 3 суток с 5-го дня трансплантации меланомы и вплоть до окончания терапии ингибитором путем измерения длины и ширины узла. Приблизительный объем опухоли рассчитывался по формуле: (длина, мм • ширина, мм)2/2. 52 тезисы конференции Ns 1800-, 5 1600! 1400- 0 1200S юоо-0 § 800- 1 600° 400% 200-VD О о- 5-й 8-й 11-й 14-й 17-й Дни О Контроль —■— ММП-9 --±-- ММП-9+13 Сравнение динамики объема опухолевого узла в каждой группе по дням проводилось с использованием дисперсионного анализа Фридмана, при получении p < 0,05 - переходили к парным сравнениям для зависимых групп, используя критерий Вилкоксона с поправкой Бонферрони. Межгрупповые сравнения по каждому дню наблюдения проводили с использованием непараметрического дисперсионного анализа Краскела—Уоллиса, при получении p < 0,05, переходили в многогрупповые сравнения. Различия между сравниваемыми показателями считали достоверными при p < 0,05. Результаты и обсуждения. Результаты измерений объемов опухолей представлены в виде графика (см. рисунок). Получены достоверные различия в изменении объема опухоли по каждому дню наблюдения в каждой группе (p < 0,05). Однако достоверных различий в объеме опухоли на каждый день наблюдения при межгрупповых сравнениях не получено, даже после начала терапии ингибитором ММП-9. Однако, как видно из рисунка, имеется отчетливая тенденция увеличения объема опухоли в группе животных, получавших терапию ингибитором в дозе, селективно ингибирующей ММП-9. Предполагалось, что в группах, получавших терапию ингибитором, опухолевый рост будет либо заторможен, либо иметь слабоположительную динамику в отличие от животных, не получавших терапию. Однако получены данные совершенно противоположны планируемым. Заключение. Требуется дальнейшее разъяснение механизмов действия металлопротеиназ при меланоме кожи для оценки возможности использования их в качестве молекулярных терапевтических мишеней. Динамика изменения среднего объема опухоли в исследуемых группах при селективном ингибировании ММП-9 и неселективном ингибировании ММП-9 и ММП-13.