Apoptostic marker (p53, bcl-2, bax) association with clinical pathologic parameters and survival in non-small cell lung carcinoma

Abstract

Full Text

Цель - исследовать экспрессию маркеров апоп- тоза (р53, bcl-2 и bax) во взаимосвязи с клиникоморфологическими параметрами и показателем 5-летней выживаемости при немелкоклеточном раке легкого (НМКРЛ). Материал и методы. Исследованы 237 операционных материалов НМКРЛ, средний возраст больных 59 лет, 203 мужчины и 34 женщины. Патогистологическая характеристика опухолей определена согласно классификации TNM 7-го пересмотра. Иммуногисто- химическим методом определяли р53 (клон DO-7), bcl-2 (клон 124) и bax (клон SP47) в автоматическом стейнере Ventana XT. В каждом случае исследовали 1000 клеток в 5-7 полях зрения при увеличении в 400 раз. Определяли индекс метки - количество положительно окрашенных клеток от общего количества подсчитанных клеток в процентах. Индекс метки р53, bcl2, bax более 10% считался положительной экспрессией (+) антигена в опухоли, менее 10% - отрицательной экспрессией (-). Статистический анализ проведен в программе STATlSTICA 6.0. При проверке статистических гипотез применяли двусторонний точный критерий Фишера для таблиц 2x2, коэффициент корреляции рангов Спирмена. Определяли общую скорректированную выживаемость больных за 5-летний период после операции, использовали метод Каплана-Мейера, регрессионную модель Кокса. Достоверность оценивали при р<0,05. Результаты. При анализе уровня экспрессии р53, bcl-2 и bax в зависимости от морфологических параметров НМКРЛ корреляции между ними не обнаружено (р<0,3). Найдено статистически значимое увеличение количества случаев с +р53 при плоскоклеточном раке по сравнению с аденокарциномой (р<0,05). Отмечается значимое увеличение +bcl-2 в группе опухолей без поражения лимфатических узлов по сравнению с опухолями с наличием лимфогенных метастазов (р<0,05), при НМКРЛ I стадии по сравнению с НМКРЛ II-III стадии (р<0,01), а также при плоскоклеточном раке по сравнению с аденокарциномой (р<0,05). Количество случаев с +bax значимо выше при аденокарциноме по сравнению с плоскоклеточным раком (р<0,05). При НМКРЛ гистогенез имел слабую корреляцию с р53 (г=0,15; р<0,05), bcl-2 (г=0,15; р<0,05) и bax (г=0,16; р<0,01), показатель N и стадия процесса - с bcl-2 (г=0,15; р<0,05 и г=0,18; р<0,01). Общая 5-летняя скорректированная выживаемость больных НМКРЛ составила 40,4 ± 3,5%. Показатели выживаемости больных НМКРЛ имели статистически значимые различия в зависимости от экспрессии р53 (р=0,03) и bcl-2 (р=0,004). Отдаленная выживаемость при +bax имела тенденцию к снижению, однако отличия не значимы. При анализе взаимосвязи уровня отдаленных результатов лечения больных НМКРЛ и коэкспрессии антигенов выявлено, что показатели 5-летней выживаемости уменьшались в ряду иммунофенотипов опухоли: 1) -p53/+bcl-2, -p53/-bcl-2, +p53/+bcl-2 и +p53/-bcl-2; 2) -p53/-bax, -p53/+bax, +p53/-bax и +p53/+bax; 3) +bcl-2/-bax, +bcl-2/+bax, -bcl-2/-bax и -bcl-2/+bax. При анализе парной коэкспрессии р53 и bcl-2 статистически значимые различия показателей выживаемости больных получены только для иммунофенотипа -p53/+bcl-2 (р < 0,001). При анализе парной коэкспрессии р53 и bax больные с иммунофенотипом +p53/+bax имели наихудший 5-летний показатель; отличия значимы по сравнению с иммунофенотипами -p53/-bax и -p53/+bax (р < 0,05). При анализе парной коэкспрессии bcl-2 и bax отмечается тенденция к снижению выживаемости при +bax в опухолях с +bcl-2 или -bcl-2 иммунофенотипом. При проведении однофакторного регрессионного анализа с выживаемостью больных НМКРЛ были связаны экспрессия р53 (%2=4,6, р=0,38, стандартная ошибка 0,18, р=0,03) и экспрессия bcl-2 (%2=8,5. Р=0,75, стандартная ошибка 0,28, р=0,008). Показатель N, наибольший размер опухоли, дифферен- цировка имели независимую взаимосвязь с выживаемостью больных НМКРЛ при многофакторном регрессионном анализе (х2=95,5; р<0,001). Заключение. Отмечается взаимосвязь экспрессии р53, bcl-2 и bax с некоторыми клинико-морфологическими параметрами НМКРЛ. Выживаемость больных НМКРЛ взаимосвязана с экспрессией p53, bcl-2 и не зависит от экспрессии bax. Выживаемость больных НМКРЛ взаимосвязана также с взаимным содержанием bcl-2, р53 и bax: продолжительнее при иммунофенотипе -p53/+bcl-2, короче при иммунофенотипе +p53/+bax. При однофакторном регрессионном анализе bcl-2 и р53 являлись факторами прогноза. Многофакторный регрессионный анализ не выявил взаимосвязи bcl-2, р53 и bax с прогнозом НМКРЛ.