Relationship between argyrophilic proteins of nucleolar organizer regions and antigen ki-67 with clinical and morphological parameters and survival in lung adenocarcinoma



Cite item

Full Text

Abstract

Investigated argyrophilic proteins associated with nucleolar organizer regions (Ag-NOR proteins) and Ki-67 antigen in lung adenocarcinoma. Defined tumor with low and high content of Ag-NOR proteins and proliferation index (PI) Ki-67. The content of Ag-NOR proteins had a relationship with the clinical and morphological parameters: parameters T, N, tumor size to 3 cm or more, stage of the disease. Survival of patients with lung adenocarcinoma is better in tumors with a low content of Ag-NOR proteins or PI Ki-67. High survival rate associated with low content of Ag-NOR proteins and PI Ki-67, low - with high content of Ag-NOR proteins and PI Ki-67, intermediate - with opposite values of the content of Ag-NOR proteins and PI Ki-67. Tumor size, parameter N and content of Ag-NOR proteins had an independent effect on survival. In lung adenocarcinoma with no metastasis to lymph nodes survival related to the size of the tumor, with metastases - with content of Ag-NOR proteins. Mutual study of Ag-NOR proteins and antigen Ki-67 has differential diagnostic and prognostic value in lung adenocarcinoma.

Full Text

Аденокарцинома легкого составляет не менее трети всех гистологических типов неоплазии этой локализа- ции. На сегодняшний день отдаленные результаты лече- ния и выживаемости больных аденокарциномой легкого далеки от желаемых. В настоящее время поиску морфо- логических параметров, связанных с выживаемостью таких больных, посвящено небольшое число работ, что требует дальнейшего изучения и уточнения [1]. Пролиферация — основополагающий процесс в воз- никновении и развитии опухоли, а также фактор прогноза ее биологического поведения. На сегодняшний день су- ществуют определенные трудности в достоверной оценке пролиферативного потенциала опухоли, так как пролифе- рация включает в себя не только количество пролифери- рующих клеток (пролиферативная активность, фракция роста), но и скорость прохождения клеткой фаз митоза (продолжительность клеточного цикла) [2]. Для оценки пролиферативной активности общепри- знанным и доступным является иммуногистохимичес кое определение уровня антигена Ki-67 [3, 4]. В много- численных экспериментальных и клинических исследо- ваниях показана связь этого маркера с определенными фазами митоза и прогнозом опухоли [2, 5, 6]. В настоящее время исследование аргирофильных белков, ассоциированных с ядрышкообразующими рай- онами (Ag-ЯОР-белков), является общепризнанным маркером скорости клеточного цикла. До 75% окраши- вания Ag-ЯОР-белков составляют два главных аргиро- фильных белка С23 (нуклеолин) и В23 (нуклеофозмин), играющих важнейшую роль в синтезе рибосомальной РНК [7]. Эти белки выявляются в ядрах клеток на про- тяжении всего клеточного цикла, количественно увели- чиваясь в 1,5—3 раза в S- и G -фазе [8]. Показана обрат- ная зависимость между количественным содержанием Ag-ЯОР-белков и длительностью клеточного цикла [9], временем удвоения опухоли [10—13]. Анализ литературы показал противоречивый харак- тер связи антигена Ki-67 и Ag-ЯОР-белков с клинико- морфологическими параметрами и выживаемостью больных со злокачественными опухолями [2, 5, 14—18]. Кроме того, отсутствуют работы, уточняющие взаим- ную связь антигена Ki-67 и Ag-ЯОР-белков в ядрах кле- Для корреспонденции: Кобяков Дмитрий Сергеевич — канд. мед. наук. зав. патологоанатомическим отд-нием; 628481, Тю- менская область, Ханты-Мансийский автономный округ — Югра, г. Когалым, ул. Молодежная, 19, e-mail: dskob@yandex.ru. ток с клинико-морфологическими параметрами и выживаемостью при аденокарциноме легкого. Исходя из вышеизложенного, целью работы стало исследование антигена Ki-67 и содержания Ag-ЯОР-белков во взаимосвязи с клинико-морфологическими параметрами и выживаемостью при аденокарциноме легкого. Материал и методы Исследованы 97 операционных материалов адено- карциномы легкого, удаленных за период 2007—2009 гг. в Алтайском краевом онкологическом диспансере (слу- чаи с М1 и множественными опухолями исключены из исследования). Патогистологическая характеристи- ка опухолей определена согласно критериям ВОЗ [19]. Средний возраст пациентов составил 60 лет (от 35 до 75 лет), 69 мужчин и 28 женщин. Кусочки ткани фиксировали 18—24 ч в 10% ней- тральном забуференном формалине. После стандартной проводки операционного материала готовили гистоло- гические срезы толщиной 4 мкм. Препараты окрашива- ли гематоксилином и эозином, ШИК-реактивом/альциа- новым синим, по Крейбергу. Иммуногистохимическим методом определяли антиген Ki-67 (клон MIB-1), ци- токератины 7 (клон SP52) и 20 (клон SP33) в автомати- ческом стейнере Ventana XT. Определяли индекс метки (ИМ) Ki-67 — количество положительно окрашенных клеток от общего количества подсчитанных клеток (в процентах). В каждом случае исследовали 1000 кле- ток в 5—7 полях зрения, при увеличении в 400 раз. Так как распределение ИМ Ki-67 в аденокарциноме легкого было непараметрическим, то меру центральной тенден- ции представляли в виде медианы, которая составила 20% (интерквартильный интервал 11—38%). Данное значение считали пороговым, что согласуется с данны- ми литературы [6]. Соответственно случаи с ИМ Ki-67 20% и более считались с высоким ИМ Ki-67 (+Ki-67), до 20% — с низким (-Ki-67). Для изучения Ag-ЯОР-белков срезы окрашивали азотнокислым серебром по одностадийной методике [20]. Перед окрашиванием срезы автоклавировали при 120˚С в течение 20 мин в 0,01 М цитратном буфере (рН 6,0) [21]. Докрашивания ядер не проводили, срезы заключали в канадский бальзам. В каждом случае определяли площадь Ag-ЯОР-белков (в мкм2) в ядрах 100—120 случайно выбранных клеток с 10—15 цифровыми изображениями, полученными с соответствующих полей зрения микроскопа при увеличении в 1000 раз (объектив х100, 22 КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Т а б лица 1 Распределение случаев с высоким и низким содержанием Ag- ЯОР-белков и ИМ Ki-67 в аденокарциноме легкого Т а б лица 2 Содержание Ag-ЯОР-белков, ИМ Ki-67 и пятилетняя общая скорректированная выживаемость в аденокарциноме легкого Характеристика Коли- чество случаев -Ag-ЯОР +Ag-ЯОР Характеристика Коли- чество случаев -Ki-67 +Ki-67 -Ki-67 +Ki-67 Первичная опухоль Т 1 32 (33) 12 (38) 12 (38) 4 (12) 4 (12) Т2 и Т3 65 (67) 21 (32) 10 (15) 9 (14) 25 (39) < 3 см 46 (47) 20 (43) 15 (33) 6 (13) 5 (11) > 3 см 51 (53) 12 (23) 8 (16) 8 (16) 23 (45) Лимфатические узлы N - 61 (63) 24 (39) 17 (28) 8 (13) 12 (20) N + 36 (37) 9 (25) 5 (14) 5 (14) 17 (47) Стадия I 54 (56) 23 (43) 14 (26) 6 (11) 11 (20) II и III 43 (44) 10 (23) 8 (19) 7 (16) 18 (42) Степень дифференцировки высокая 17 (18) 12 (70) 2 (12) 3 (18) — умеренная и низкая 80 (82) 21 (26) 20 (25) 10 (13) 29 (36) Приме чани е. В скобках — проценты. 1.25, oil). Компьютерный анализ изображений проводи- ли в программе ImageJ 1.42. Для исключения ошибки измерений гранулы размером менее 0,1 мкм² исключе- ны из анализа. В качестве внутреннего контроля окра- шивания использовали площадь Ag-ЯОР-белков в ядрах малых лимфоцитов [22]. Находили индекс площади Ag- ЯОР-белков — частное от деления площадей Ag-ЯОР- белков в клетке опухоли и малом лимфоците. Так как распределение индекса площади Ag-ЯОР-белков в аде- нокарциноме легкого было параметрическим, то меру центральной тенденции представляли в виде среднего значения, которое составило 6,05 (стандартное отклоне- ние 1,78). По аналогии с оценкой ИМ Ki-67 случаи с ин- дексом площади Ag-ЯОР-белков 6,05 и более считались с высоким содержанием Ag-ЯОР-белков (+Ag-ЯОР), до 6,05 — с низким (-Ag-ЯОР). Статистический анализ полученных данных осуществляли в программе Statistica 6.0. При проверке статистических гипотез применяли двусторонний точный критерий Фишера для таблиц 2х2, коэффициент корреляции рангов Спирмена (r). Определяли общую скорректированную выживаемость больных за пятилетний период после операции, использовали метод Каплана— Мейера, логарифмический ранговый тест, регрессионную модель Кокса. Достоверность полученных критериев оценивали при p <0,05. Результаты и обсуждение В аденокарциноме легкого найдена слабая корре- ляция между индексом площади Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67 (r = 0,32; p < 0,001). Кросстабулированное рас- пределение случаев аденокарциномы легкого с высоким и низким содержанием Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67 в зависимости от морфологических параметров опухоли представлено в табл. 1. Отмечалось статистически значимое увеличение ко- личества случаев с +Ag-ЯОР в группе опухолей с Т2 и Т3 по сравнению с Т1 — 34 (53%) и 8 (24%) случаев соответственно (р=0,02). Однако при исследовании ИМ Содержание Ag-ЯОР-белков низкое 55 57 39,0±8,2 высокое 42 43 13,1±5,6 ИМ Ki-67 низкий 46 47 44,6±8,4 высокий 51 53 16,7±6,1 Тип опухоли по содержанию Ag- ЯОР-белков и ИМ Ki-67 1-й тип: -Ag-ЯОР/-Ki-67 33 34 46,5±10,8 2-й тип: -Ag-ЯОР/+Ki-67 3-й тип: +Ag-ЯОР/-Ki-67 4-й тип: +Ag-ЯОР/+Ki-67 "промежуточный" тип Ki-67 статистически значимого различия не получено в этих группах —35 (54%) и 16 (50%) случаев соответ- ственно. В аденокарциноме легкого с размером первич- ной опухоли более 3 см количество случаев с +Ag-ЯОР больше, чем в опухоли менее 3 см — 31 (61%) и 11 (24%) случаев соответственно (p < 0,001). Также количество случаев с +Ki-67 больше в опухолях размером более 3 см по сравнению с небольшими опухолями (соответ- ственно 31 (61%) и 20 (44%) случаев), однако разни- ца статистически недостоверна. Количество случаев с +Ag-ЯОР достоверно больше в группе опухолей с на- личием метастазов в лимфатические узлы по сравнению с опухолями без метастазов — соответственно 22 (61%) и 20 (33%) случаев (р=0,01). Количество случаев с +Ki- 67 достоверно не различается между этими группами — соответственно 22 (61%) и 29 (48%) случаев. Во II и III стадиях заболевания количество случаев с +Ag-ЯОР до- стоверно больше, чем в I стадии — соответственно 25 (58%) и 17 (31%) случаев (р=0,01). Количество случаев с +Ki-67 достоверно не различается между этими груп- пами — соответственно 26 (61%) и 25 (46%) случаев. Количество случаев с +Ag-ЯОР и +Ki-67 больше в груп- пе умеренно- и низкодифференцированных опухолей по сравнению с высокодифференцированными опухолями: для Ag-ЯОР-белков — 39 (49%) и 3 (18%) случая соот- ветственно; для ИМ Ki-67 — 49 (61%) и 2 (12%) случая соответственно. Однако сравнение этих данных стати- стическими методами некорректно ввиду наличия еди- ничных наблюдений. Содержание Ag-ЯОР-белков в аденокарциноме лег- кого имело слабую корреляцию с показателем Т (r=0,31, р=0,01), размером первичной опухоли до 3 см и более (r=0,36; p <0,001), показателем N (r=0,34; р=0,006) и стадией заболевания (r=0,33; р=0,008). ИМ Ki-67 не имел взаимосвязи с вышеперечисленными показателя- ми. Степень дифференцировки аденокарциномы легко- го имела слабую корреляцию с содержанием Ag-ЯОР- белков (r=-0,31; р=0,01) и ИМ Ki-67 (r=0,39; p <0,001). На ранних стадиях развития аденокарциномы легкого (Т1, размер опухоли менее 3 см, N0, стадия I) содержание Ag-ЯОР-белков в клетках опухоли меньше по сравнению с последующими стадиями процесса. Также в опухо- 23 РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, № 3, 2013 Графики выживаемости по Каплану—Мейеру больных аденокарциномой легкого. а — с низким и высоким содержанием Ag-ЯОР-белков; б — с низким и высоким ИМ Ki-67; в — при четырех типах опухоли (по взаимному содержанию Ag- ЯОР-белков и ИМ Ki-67); г — при трех типах опухоли (по взаимному содержанию Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67). По оси абсцисс — время жизни (в днях), по оси ординат — доля выживших больных. лях без солидизации (высокодифференцированные) по сравнению с опухолями с разной степенью солидизации (умеренно и низкодифференцированные) минимально содержание Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67. Таким образом, имелась связь активности ядрышковых организаторов с клинико-морфологическими параметрами аденокарцино- мы легкого (в отличие от антигена Ki-67, где связь отсут- ствовала), что указывает на связь опухолевой прогрессии с рибосомальным синтезом клетки. На основании полученных данных выделены четыре типа аденокарциномы легкого в зависимости от содер- жания Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67 (табл. 2). С выделенными типами опухолей наблюдалась сла- бая корреляция основных морфологических параметров аденокарциномы легкого: показателя T (r=0,31; р=0,01), размера опухоли до 3 см и более (r=0,36; p <0,001), по- казателя N (r=0,31; р=0,01), стадии процесса (r=0,30; р=0,03) и отсутствие корреляции со степенью диффе- ренцировки опухоли. Общая скорректированная выживаемость больных аденокарциномой легкого за пятилетний период после операции составила 30,4±5,3%. Выживаемость больных аденокарциномой легкого имела статистически значимое различие в зависимости от содержания Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67 (см. табл. 2; рис. а, б). Наблюдалось последова- тельное уменьшение выживаемости от 1-го типа опухолей ко 2, 3 и 4-му типу. Статистически значимые отличия выживаемости больных получены только между 1-м и 4-м, 1-м и 3-м, 4-м и 2-м типами (см. табл. 2; рис. в). Исходя из полученных данных, 2-й и 3-й типы аденокарциномы легкого объединены в "промежуточный" тип, в котором содержание Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67 имело противоположные значения (-Ag-ЯОР/+Ki-67 и +Ag-ЯОР/-Ki-67). Выживаемость больных с "промежуточным" типом опухолей статистически значимо отличалась от таковой при опухолях 1-го и 4-го типов и имела промежуточное значение (см. табл. 2; рис. г). При проведении многомерного регрессионного анализа показатель Т, степень дифференцировки, ИМ Ki-67, данные о выделении четырех или трех типов опухолей (по взаимному содержанию Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki- 67) не имели влияния на выживаемость больных аденокарциномой легкого. Большее влияние на выживаемость имели размер опухоли по сравнению с показателем Т (χ2=46,6, χ2=42,8 соответственно), а также сочетание размера опухоли и показателя N по сравнению со стадией процесса (χ2=46,6, χ2=45,2 соответственно). Таким образом, три критерия — размер опухоли (до 3 см или более), показатель N (отсутствие или наличие метастазов в лимфатические узлы), содержание Ag-ЯОР-белков (низкое или высокое) — имели независимое влияние на выживаемость больных аденокарциномой легкого, из которых 24 КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Т а б лица 3 Регресионный анализ по Коксу и факторы прогноза в аденокарциноме легкого Фактор прогноза β Стандартная ошибка р содержание Ag-ЯОР-белков 0,33 0,39 0,40 Наличие метастазов: размер опухоли 0,26 0,36 0,47 содержание Ag-ЯОР-белков 1,06 0,47 0,02 показатель N имел наибольшее значение (табл. 3). Исхо- дя из этого, исследовано влияние на выживаемость раз- мера опухоли и содержания Ag-ЯОР-белков в опухолях с отсутствием и наличием метастазов в лимфатические узлы. В аденокарциноме легкого с отсутствием метаста- зов выживаемость больных была связана только с раз- мером опухоли (χ2=15,6, p <0,001), и наоборот, с наличи- ем метастазов — только с содержанием Ag-ЯОР-белков (χ2=8,2, р=0,02) (см. табл. 3). В нашем исследовании найдена корреляция содержа- ния Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67 в аденокарциноме лег- кого, что согласуется с данными исследований опухолей молочной железы [23], желудка [24], толстой кишки [25]. Однако только содержание Ag-ЯОР-белков в клет- ках аденокарциномы легкого было связано с целым ря- дом клинико-морфологических параметров по системе TNM: показателями Т, N, размером первичной опухоли до 3 см и более, стадией заболевания. S. Kaneko и соавт. [26] получили аналогичные выводы при исследовании ядрышковых организаторов при раке легкого. Выживаемость больных аденокарциномой легкого с -Ag-ЯОР или -Ki-67 достоверно выше по сравнению с опухолями с +Ag-ЯОР или +Ki-67. Такая взаимосвязь активности ядрышковых организаторов и количества Ki-67 положительных клеток с выживаемостью больных со злокачественной опухолью прослежена и в других исследованиях [2, 5, 15, 17, 18]. По данным литературы, взаимосвязь активности ядрышковых организаторов с выживаемостью больных карциномой разных органов и гистогенеза значительно чаще прослеживается при определении площади Ag-ЯОР-белков с помощью ком- пьютерного анализа изображений, чем при визуальном подсчете количества Ag-ЯОР-белков. В зависимости от взаимного содержания Ag-ЯОР- белков и ИМ Ki-67 выделены четыре типа аденокарци- номы легкого и найдено последовательное уменьшение выживаемости в ряду: -Ag-ЯОР/-Ki-67, -Ag-ЯОР/+Ki-67, +Ag-ЯОР/-Ki-67, +Ag-ЯОР/+Ki-67. Сходные актуари- альные кривые выживаемости, на основе взаимного содержания Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67, получены M. Lorenzato и соавт. [27] при исследовании рака молочной железы. Н.Т. Райхлин и соавт. [14] в исследовании 20 случаев "малого" рака легкого (размером до 3 см) по- казали, что для больных с продолжительностью жизни 3—5 лет характерен тип -Ag-ЯОР/+Ki-67, а с продолжи- тельностью жизни до 2 лет характерен тип +Ag-ЯОР/- Ki-67. В нашем исследовании не получено статисти- чески значимого различия в выживаемости больных аденокарциномой легкого типов -Ag-ЯОР/+Ki-67 и +Ag- ЯОР/-Ki-67. Поэтому эти два типа были объединены в один (с противоположными значениями содержания Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67), в котором выживаемость достоверно отличалась от -Ag-ЯОР/-Ki-67-типа и +Ag- ЯОР/+Ki-67-типа и имела промежуточное значение. При проведении многомерного регрессионного ана- лиза три критерия — размер опухоли, состояние лимфа- тических узлов, содержание Ag-ЯОР-белков — имели независимое влияние на выживаемость больных. Мно- гочисленные исследования, посвященные изучению активности ядрышковых организаторов в злокачествен- ных опухолях, также указывают, что содержание Ag- ЯОР-белков является независимым фактором прогноза [18, 23]. В аденокарциноме легкого с отсутствием ме- тастазов в лимфатические узлы выживаемость больных была связана с размером опухоли, а при наличии мета- стазов — с содержанием Ag-ЯОР-белков. Вероятно, вы- живаемость больных аденокарциномой легкого без ме- тастатического потенциала связана со скоростью роста первичной опухоли (локальным увеличением размера), а с появлением метастатического потенциала — со ско- ростью клеточного цикла раковых клеток как в первич- ной опухоли, так и в метастазах. Таким образом, взаимное определение содержания Ag-ЯОР-белков и ИМ Ki-67 имеет дифференциально- диагностическое и прогностическое значение при аде- нокарциноме легкого. Выводы 1. В аденокарциноме легкого содержание Ag-ЯОР- белков связано с клинико-морфологическими параметра- ми по системе TNM: показателями Т, N, размером пер- вичной опухоли до 3 см и более, стадией заболевания. 2. Выживаемость больных аденокарциномой легко- го с низким содержанием Ag-ЯОР-белков или ИМ Ki-67 лучше по сравнению с высоким содержанием Ag-ЯОР- белков или ИМ Ki-67. 3. Выживаемость больных аденокарциномой легкого высокая с типом -Ag-ЯОР/-Ki-67, низкая с типом +Ag- ЯОР/+Ki-67, промежуточная с типами Ag-ЯОР/+Ki-67 и +Ag-ЯОР/-Ki-67. 4. Размер опухоли, состояние лимфатических узлов, содержание Ag-ЯОР-белков — независимые факторы прогноза при аденокарциноме легкого. В аденокарциноме легкого с отсутствием метастазов в лимфатические узлы выживаемость больных связана с размером опухоли, а при наличии метастазов — с содержанием Ag-ЯОР-белков.
×

About the authors

D. S Kobyakov

Kogalymskaya City Hospital, 628481, Kogalym, Russian Federation

Email: dskob@yandex.ru

V. V Klimachev

The Altai State of Medical University of the Ministry of Health of Russia

A. M Avdalyan

Altay branch of N.N.Blokhin Russian Cancer Research Center of the Russian Academy of Medical Sciences

I. P Bobrov

Altay branch of N.N.Blokhin Russian Cancer Research Center of the Russian Academy of Medical Sciences

A. F Lazarev

Altay branch of N.N.Blokhin Russian Cancer Research Center of the Russian Academy of Medical Sciences

References

  1. Лактионов К.К., Давыдов М.И., Полоцкий Б.Е., Зборовская И.Б., Богатырев В.Н., Никуличев Л.А. и др. Прогностические и предсказывающие факторы у больных немелкоклеточным раком легкого. Практическая онкология. 2006; 7(3): 145-53.
  2. van Diest P.J., Brugal G., Baak J.P. Proliferation markers in tumours: interpretation and clinical value. J. Clin. Pathol. 1998; 51(10): 716-24.
  3. Шацева Т.А., Мухина М. С. Антиген Ki-67 в оценке опухолевой пролиферации. Его структура и функция. Вопросы онкологии. 2004; 50(2): 157-64.
  4. Scholzen T., Gerdes J. The Ki-67 protein: from the known and the unknown. J. Cell Physiol. 2000; 182(3): 311-22.
  5. Brown D.C., Gatter K.C. Ki-67 protein: the immaculate deception? Histopathology. 2002; 40(1): 2-11.
  6. Jakobsen J.N., Sorensen J.B. Clinical impact of Ki-67 labeling index in non-small cell lung cancer. Lung Cancer. 2013; 79(1): 1-7.
  7. Roussel P., Hernandez-Verdun D. Identification of AgNOR proteins, markers of proliferation related to ribosomal gene activity. Exp. Cell Res. 1994; 214(2): 465-72.
  8. Sirri V., Roussel P., Herncndez-Verdun D. The AgNOR proteins: qualitative and quantitative changes during the cell cycle. Micron. 2000; 31(2): 121-6.
  9. Ccnet V., Montmcsson M.P., Usson Y., Giroud F., Brugcl G. Correlation between silver-stained nucleolar organizer region area and cell cycle time. Cytometry. 2001; 43(2): 110-6.
  10. Trere D., Pession A., Montcncro L., Chieco P., Derenzini M. AgNOR protein expression and tumor growth rate of human carcinoma xenografts growing subcutaneously in nude mice. Eur. J. Histochem. 1997; 41(Suppl. 2): 153-4.
  11. Derenzini M., Sirri V., Trere D., Ochs R. The quantity of nucleolar proteins nucleolin and protein B23 is related to cell doubling time in human cancer cells. Lab. Invest. 1995; 73(4): 497-502.
  12. Ofner D., Hittmcir A., Mcrth C., Ofner D., Totsch M., Dcxenbichler G. et al. Relationship between quantity of silver-stained nucleolar organizer regions associated proteins (Ag-NORs) and population doubling time in ten breast cancer cell lines. Pathol. Res. Pract. 1992; 188(6): 742-6.
  13. Ogurc S., Abe S., Sukoh N., Kunikcne H., Nckcjicmc I., Inoue K. et al. Correlation between nucleolar organizer regions visualized by silver staining and the growth rate of lung adenocarcinoma. Cancer. 1992; 70(1): 63-8.
  14. Райхлин Н.Т., Букаева И.А., Смирнова Е.А., Гуревич Л.Е., Делекторская В.В., Полоцкий Б.Е. и др. Значение экспрессии ядрышковых аргирофильных белков и антигена Ki-67 в определении пролиферативной активности клеток и прогноза "малого" (Т1) рака легкого. Архив патологии. 2008; 70(3): 15-8.
  15. Ccrvclho P.E., Antoncngelo L., Berncrdi F.D., Leco L.E., Rodrigues O.R., Ccpelozzi V.L. Useful prognostic panel markers to express the biological tumor status in resected lung adenocarcinomas. Jpn J. Clin. Oncol. 2000; 30(11): 478-86.
  16. Mctheus R.S., Berncrdi F. Del C., Gcllo C. P., dc Silvc A. P., Rodrigues O. R., Ccpelozzi M. et al. Nuclear markers (star volume, mitotic index, AgNOR and Ki-67) of the primary tumor and its metastasis in non-small cell lung carcinomas. Pathol. Res. Pract. 2004; 200(1): 13-23.
  17. Rodrigues O.R., Antoncngelo L., Ycgi N., Mincmoto H., Schmidt Junior A.F., Ccpelozzi V.L. et al. Prognostic significance of argyrophilic nucleolar organizer region (AgNOR) in resected nonsmall cell lung cancer (NSCLC). Jpn J. Clin. Oncol. 1997; 27(5): 298-304.
  18. Pich A., Chiusc L., Mcrgcric E. Prognostic relevance of AgNORs in tumor pathology. Micron. 2000; 31(2): 133-41.
  19. Trcvis W.D., Brcmbillc E., Muller-Hermelink H.K., Hcrris C.C., eds. World Health Organization classification of tumours. Pathology and genetics of tumours of the lung, pleura, thymus and heart. Lyon: IARC Press; 2004.
  20. Ploton D., Mencger M., Jecnnesson P., Himber G., Pigeon F., Adnet J.J. Improvement in the staining and in the visualization of the argyrophilic proteins of the nucleolar organizer region at the optical level. Histochem. J. 1986; 18(1): 5-14.
  21. Aubele M., Biesterfeld S., Derenzini M., Hufncgl P., Mcrtin H., Ofner D. et al. Guidelines of AgNOR quantitation. Zbl. Pathol. 1994; 140(1): 107-8.
  22. Derenzini M., Trere D. Standardization of interphase Ag-NOR measurement by means of an automated image analysis system using lymphocytes as an internal control. J. Pathol. 1991; 165(4): 337-42.
  23. Cecccrelli C., Trere D., Scntini D., Tcffurelli M., Chieco P., Derenzini M. AgNORs in breast tumours. Micron 2000; 31(2): 143-9.
  24. Giuffre G., Mormcndi F., Bcrresi V., Bordi C., Tucccri G., Bcrresi G. Quantity of AgNORs in gastric endocrine carcinoid tumours as a potential prognostic tool. Eur. J. Histochem. 2006; 50(1): 45-50.
  25. Кобяков Д.С. Сравнительный анализ пролиферативной активности эпителиальных клеток аденомы и рака толстой кишки: Автореф. дис.. канд. мед. наук. Томск; 2006.
  26. Kcneko S., Ishidc T., Sugio K., Yokoycmc H., Sugimcchi K. Nucleolar organizer regions as a prognostic indicator for stage I non-small cell lung cancer. Cancer Res. 1991; 51(15): 4008-11.
  27. Lorenzcto M., Abboud P., Lechki C., Browcrnyj F., O’Donohue M. F., Ploton D. et al. Proliferation assessment in breast cancer: a double-staining technique for AgNOR quantification in MIB-1 positive cells especially adapted for image cytometry. Micron. 2000; 31(2): 151-9.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2013 Eco-Vector


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС 77 - 86496 от 11.12.2023 г. 
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ЭЛ № ФС 77 - 80673 от 23.03.2021 г.


This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies