INTRATUMORAL STROMAL MAST CELLS IN RENAL CELL CARCINOMA: CLINICAL AND MORPHOLOGICAL COMPARISONS

Full Text

Интерес к изучению микроокружения клеток злокачественных новообразований, и в том числе к стромальным интратуморальным тучным клеткам (ТК), сохраняется на протяжении последних десятилетий [1-6]. ТК присутствуют в нормальной и патологически измененной почке [7, 8]. Имеется небольшое количество работ, посвященных исследованию прогностического значения ТК при почечно-клеточном раке (ПКР). По данным B. Tuna и соавт. [9], содержание интратуморальных ТК значительно выше при раке почки (РП), чем в нормальной почечной ткани, что, по мнению данных авторов, объясняется их участием в туморогенезе. Однако авторами не было найдено взаимосвязей между числом ТК в опухоли и важными факторами прогноза ПРК: полом и возрастом больных, клинической стадией заболевания, размером опухолевого узла, градацией по Fuhrman, при этом количество ТК было значительным в светлоклеточных карциномах. Более высокое число интратуморальных ТК в светлоклеточных карциномах авторы объясняют высокой метаболической потребностью данного гистологического типа рака почки (РП). Аналогичные данные получили и другие авторы [10]. В то же время M.E. Guldur и соавт. [11] нашли значимые корреляции между числом ТК в опухоли и клинической стадией, градацией по Fuhrman, размером и гистологическим типом опухоли. Таким образом, работы, посвященные исследованию прогностического значения интратуморальных стромальных ТК при ПКР, немногочисленны и противоречивы, и поэтому данный элемент микроокружения опухоли нуждается в дальнейшем изучении. Целью работы стало исследование интратуморальных стромальных ТК при ПКР, поиск взаимосвязей с важными клинико-анатомическими факторами прогноза и послеоперационной выживаемостью больных. Материал и методы Изучен операционный материал 63 больных ПКР, из них мужчин было 34 (54%), женщин - 29 (46%). Средний возраст пациентов составил 58,2 ± 1,2 года. Во всех наблюдениях ПКР классифицировали в соответствии с классификацией ВОЗ 2004 г. По гистологическому строению опухоли были представлены следующим образом: светлоклеточный рак - 52 случая; папиллярный рак - 5; хромофобный рак - 3; веретеноклеточный (саркоматоидный) рак - 3. Степень распространенности опухолевого процесса оценивалась в соответствии с TNM-классификацией злокачественных опухолей (TNM. Classification of Malignant Tumors, edited by L.H. Sobin, 2002) [12]. Среди наших пациентов I клинической стадии (T1N0M0) соответствовали 47 (74,6%) больных; II стадии (T2N0M0) - 3 (4,8%) больных; III стадии (T1N1M0, T2N1M0, T3N0M0, T3N1M0) - 8 (12,7%) и IV стадии (T4N0M0, T4N1M0, TлюбаяN2M1, TлюбаяNлюбаяM1) - 5 (7,9%). Степень злокачественности опухолевых клеток оценивали по S.A. Fuhrman и соавт. (1982 г.) [13]. Степени анаплазии G1 соответствовала 31 (49,2%) опухоль, степени анаплазии G2 - 14 (22,2%) опухолей, степени анаплазии G3 - 13 (20,6%) опухолей и степени анаплазии G4 - 5 (8%) опухолей. Карцином с регионарными и отдаленными метастазами было 11 (17,5%), локализованных опухолей - 52 (82,5%). Средний размер опухолевого узла составил 7,1 ± 0,3 см. Контролем служила ткань почек, забранная из максимально удаленных от опухоли участков, без выраженных явлений воспаления и склероза. Материал фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине на протяжении 12-24 ч. Гистологические препараты окрашивали гематоксилином и эозином и на кислые мукополисахариды коллоидным железом по Гале. ТК выявляли иммуногистохимическим методом с помощью моноклональных антител c-kit (CD117) (клон А4052, разведение 1:200, DAKO) по рекомендованному производителем протоколу. Высчитывали среднее количество ТК в 3 полях зрения при увеличении микроскопа в 400 раз. Сведения о выживаемости больных получали по данным регистра злокачественных заболеваний и амбулаторных карт (за 2010-2016 гг.). Статистическую обработку материала проводили при помощи статистического пакета Statistica 6.0. При нормальном распределении данных при проверке статистических гипотез применяли методы параметрической статистики (t-test Стьюдента), а если полученные данные не соответствовали критериям нормального распределения (критерий Шапиро-Уилка, W = 0,89; p < 0,01), то применяли тест Колмогорова-Смирнова или U-тест Манна-Уитни. Данные считали достоверными при p < 0,05. Построение кривых выживаемости проводили по методу Kaplan-Meier, достоверность различий показателей выживаемости оценивали с помощью log-rank теста. Результаты и обсуждение Результаты проведенного исследования показали, что в неизмененной ткани почки ТК располагались поодиночке или группами. Они имели круглую, овальную или отростчатую форму и располагались преимущественно в интерстициальной ткани, возле сосудов и между канальцами. В среднем число ТК в ткани почки составило 2,3 ± 0,2 в 3 полях зрения при увеличении микроскопа в 400 раз. Среди всех больных ПКР вне зависимости от пола, возраста, гистологического типа и других клинико-морфологических показателей разброс средних значений плотности распределения ТК колебался в интервале 0-10. Среднее значение плотности распределения ТК при ПКР составило 2,5 ± 0,2. Сопоставление среднего числа ТК в строме опухоли с прогностически важными клинико-анатомическими факторами ПКР позволило выявить некоторые корреляционные взаимосвязи. Плотность распределения ТК была взаимосвязана c клинической стадией заболевания (r = 0,69; p = 0,0001), размером опухолевого узла (r = 0,58; p = 0,0001), наличием регионарных и дистантных метастазов (r = 0,48; p = 0,0001), степенью анаплазии опухоли по Fuhrman (r = 0,89; p = 0,001) и послеоперационной выживаемостью больных (r = 0,4; p = 0,001). Не было обнаружено корреляции с полом (r = -0,03; p = 0,8), возрастом больных (r = -0,15; p = 0,25) и гистологическим вариантом опухоли (r = 0,16; p = 0,19) (табл. 1). Среднее значение ТК в опухолях у мужчин составило 2,6 ± 0,2, у женщин - 2,4 ± 0,2 (p = 0,6) (табл. 2). В зависимости от возраста пациентов средние показатели числа ТК составили: у больных в возрасте 30-39 лет - 1 ± 0,4; 40-49 лет - 3,7 ± 0,4; 50-59 лет - 2,5 ± 0,3; 60-69 лет - 2,4 ± 0,3 и 70-79 лет - 1,8 ± 0,25. Таким образом, самые высокие показатели ТК в строме опухоли наблюдались в возрастной группе больных 40-49 лет, а самые низкие в группе 30-39 лет (см. табл. 2). При анализе содержания ТК в зависимости от клинической стадии заболевания по TNM получены следующие результаты: у пациентов с I стадией среднее число ТК составило 1,85 ± 0,15; при II стадии число ТК возрастало до 2,7 ± 0,4; при III стадии количество ТК увеличивалось до 4,3 ± 0,4, и в IV стадии оно равнялось 6,3 ± 0,6. Таким образом, в III и IV стадиях отмечали достоверное увеличение числа ТК по сравнению с I стадией, а в IV стадии среднее число гранул серебра (AgNORs) значимо возрастало по сравнению с III стадией патологического процесса (см. табл. 2). При исследовании различных гистологических вариантов ПКР наибольшее среднее количество ТК обнаружено в веретеноклеточной карциноме (6,3 ± 0,6), а наименьшее число - при папиллярном раке (1,05 ± 0,4). Промежуточное положение занимали хромофобный (2,4 ± 0,4) и светлоклеточный рак (2,5 ± 0,2). Таким образом, наибольшее число ТК выявляли в веретеноклеточном варианте рака, а наименьшее - в папиллярном (см. табл. 2). При сопоставлении степени ядерной атипии по Fuhrman с числом ТК получены следующие результаты: при GI число ТК составило 1,1 ± 0,1, при GII оно возрастало до 2 ± 0,2, при GIII оно составило 4,8 ± 0,3, и при GIV - 6,3 ± 0,5. Таким образом, обнаружено достоверное возрастание числа стромальных ТК при увеличении степени анаплазии клеток опухоли (см. табл. 2). При размере опухолевого узла менее 7 см число стромальных ТК равнялось 1,9 ± 0,15, а при размере 7 см и более количество ТК в опухоли достоверно увеличивалось - до 4,7 ± 0,4 (см. табл. 2). В опухолях больных без регионарных и отдаленных метастазов содержание ТК составило 2 ± 1,2, а при наличии метастазов оно достоверно возрастало - до 4,7 ± 0,4 (см. табл. 2; рис. 1, см. 3-ю полосу обложки). Для оценки отдаленных результатов - 5-летней послеоперационной выживаемости больных в зависимости от среднего числа стромальных ТК в опухоли, новообразования нами были разделены на 2 группы: 1-ю группу составили карциномы с малым числом ТК (<3), во 2-ю группу включены карциномы с большим числом ТК (≥3). При анализе по Каплану-Мейеру обнаружено, что когда число ТК в опухоли составляло менее 3, то кумулятивная доля выживших к 1800-му дню составила 1 (100%), а когда количество ТК в опухоли составляло 3 и более, то кумулятивная доля выживших к 1800-му дню снижалась до 0,62 (62%). При сравнении выживаемости групп больных с использованием логарифмического рангового критерия установлено, что различия данных достоверны (log-rank p = 0,00015) (рис. 2). Таким образом, результаты проведенного исследования показали, что число стромальных ТК в опухоли взаимосвязано с рядом важных прогностических клинико-анатомических факторов ПКР, и поэтому данный параметр может быть использован в качестве дополнительного фактора прогноза. Увеличение количества ТК в опухоли можно рассматривать как критерий вероятного возникновения метастазов опухоли. Выявлена взаимосвязь между числом ТК и выживаемостью больных: высокий уровень содержания ТК является неблагоприятным фактором 5-летней послеоперационной выживаемости больных при ПКР.

About the authors

A. V Kazarcev

Altai State Medical University

Barnaul, 656038, Russian Federation

T. M Cherdanceva

Altai State Medical University

Email: drakon@agmu.ru
Barnaul, 656038, Russian Federation

I. P Bobrov

Altai State Medical University

Barnaul, 656038, Russian Federation

A. F Lazarev

Altai Branch of the N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center

Barnaul, 656049, Russian Federation

V. V.I Klimachev

Altai State Medical University

Barnaul, 656038, Russian Federation

References

Supplementary files